Sala del Holy Rood Palace. Dice che la città ha rivolte. Qualcuno che non gli era familiare alla testa della folla - mummers, mascherati, ballerini con campane, persone con il cappuccio nero - minacciarono, predissero e esortarono le persone a non obbedire alla regina. Il cortigiano della regina Riccio conferma che anche lui guarda di tanto in tanto mentre le persone ascoltano avidamente questi sermoni. La pagina racconta inoltre che la gente irruppe nella cappella della regina gridando: "Il nido dei papisti!", Che il buffone di Darnley, il marito della regina, saltò su per l'altare e cominciò a fingere di essere un sermone, e la gente gli rispose con beffe distici. La regina Mary Stuart nella disperazione. Sente l'odio della gente, la maggior parte dei cortigiani l'ha lasciata; si chiede come il suo cristianesimo possa essere così diverso dal cristianesimo del popolo scozzese. Riccio propone di preparare immediatamente un decreto che punisce i responsabili delle rivolte. Maria detta la sua pagina, la pagina chiarisce se inserire il nome di Heinrich Darnley, il marito della regina. Maria esita; sospetta che i disordini siano stati ispirati da lui - dopo tutto, la folla era guidata dal buffone del re. Qui Riccio le ricorda che è la regina; è come il sole e ha il diritto di punire da Dio. Chiede di chiamare immediatamente l'ufficiale di turno per annunciare il decreto della Regina. Entra Douglas. Maria gli dice di portare il giornale al Cancelliere reale Morton, in modo da timbrarlo. Douglas analizza il decreto e vede che non ha il nome del re. Chiede alla regina di questo. Riccio è responsabile per lei. Douglas sta perdendo la calma. Sollecita la regina a non usare sanguinose misure di soppressione, suggerisce di vederlo come un'influenza francese o italiana. Ma la regina gli ricorda freddamente il suo potere di eliminare i soggetti disubbidienti alla sua volontà. Scoppia una lite tra Riccio e Douglas, Douglas sfida Riccio a duello e giura che ucciderà il veneziano domani. La regina parte e porta via Riccio. Douglas è rimasto solo, sta considerando un duello. Entra Morton. Douglas gli mostra il decreto. Morton è indeciso: ha paura dell'ira sia del re che della regina. Senza timbrare, Morton fa un'offerta al re. In quel momento, Henry era impegnato in una conversazione con il suo giullare Nick, che lo prende in giro con il fatto che la regina ha un vero potere in Scozia, ed Henry è solo suo marito, che la regina sceglie quelli vicini, ad esempio, questo arpista italiano Riccio ... In questo momento, Morton porta uno sfortunato decreto. Re in collera, decide di uccidere Riccio. Il re Lindsay entra in campo, chiama il re a caccia con il falco appena acquisito. Morton risponde che il re ha già un'occupazione oggi. Lindsay si unisce volentieri alla trama contro Riccio. Vieta letteralmente di uccidere Riccio stasera, perché deve ucciderlo domani mattina. Quindi Henry, approfittando del ritardo, invia il giullare all'astrologo per scoprire qual è la posizione delle stelle per le sue intenzioni.
L'astrologo nel suo laboratorio (è anche un alchimista) discute con se stesso che l'esperienza conferma l'inutilità della scienza, che lo scopo, la volontà delle stelle dominano l'uomo, eliminano il bene e il male. Nick entra, spruzza di arguzia, l'astrologo non è inferiore a lui in spirito. Nick riferisce che il re lo ha mandato a chiedere del destino di Riccio e dice all'astrologo di predire la morte di Riccio. L'astrologo risponde che le stelle lo diranno, non le persone, e a sua volta predice la morte del giullare. Con quello se ne va. Appare la pagina della regina causata dall'astrologo. Page ama la sua padrona. L'astrologo gli dice di dire alla regina che oggi l'uomo che ama morirà. "Come, Botwell morirà oggi?" - esclama una pagina. L'astrologo è perplesso. Aveva in mente Riccio e sta affrettando la pagina per avvertirlo di questo. Rimasto solo, l'astrologo si chiede - dalle stelle sembrava anche che Botwell fosse in qualche modo oscuro collegato con la regina - attraverso Marte, Saturno ... Botwell entra. Dal suo monologo, diventa chiaro che si è inaspettatamente trovato nella casa di un astrologo. Rendendosi conto di dove è arrivato, Botwell chiede all'astrologo quanto gli è rimasto da vivere. Il vecchio risponde che tre anni e che Botwell sarà il re. Il botwell estrae una bottiglia di veleno con cui voleva suicidarsi, vuole gettarlo via ed esitando. In effetti, nell'atmosfera degli intrighi di palazzo, qualsiasi arma tornerà utile. Se ne sta andando.
La pagina dice alla regina che Riccio arriverà presto. La regina non vede l'ora: a suo avviso, lui solo è rimasto fedele a lei. "E Botvel?" - chiede la pagina. "Chi è Botvel?" - la regina è interessata. Una pagina sorpresa racconta a Maria come, mentre navigava, un forte vento spuntava una rosa dalla testa della regina, un fiore cadde nell'acqua. E poi uno dei cortigiani - Botvel - si precipitò sulla barca e inseguì spaventosamente il vogatore per catturare una rosa dall'acqua. Dopo aver ascoltato la storia, Mary manda una pagina per pregare. Confessa a Dio di non avere più forza per resistere al suo amore per Botwell. La regina sa che a corte è considerata innamorata di Riccio. Entra Riccio. Maria segnala un pericolo mortale che lo minaccia e gli dice freddamente addio, indicandolo alla nave che lo porterà a Roma. Disperato, Riccio cerca di implorare la regina di annullare la decisione di andarsene. La regina è irremovibile.
Heinrich, Morton e Lindsay vennero a sapere dell'imminente partenza di Riccio e deliberatamente gli conferirono di ucciderlo o lasciarlo navigare. Quindi appare Douglas e riferisce che Riccio ha già navigato. Douglas nella disperazione, desidera ardentemente una vendetta sanguinosa, il suo onore cavalleresco è ferito. All'improvviso incontrano una pagina che porta alla regina un biglietto di Riccio: non se ne è andato e sarà con lei la sera. I cospiratori portano via la nota.
Maria è impegnata a ricamare nella sua stanza. Riccio, che è venuto, le spiega che non poteva andarsene, perché al mattino ha un duello con Douglas. Ammette che non ha bisogno della vita senza il suo amore. Chiede a Maria di regalargli una corona di rose - pianterà fiori sull'altare di Roma ... Henry, Douglas e Dindsay entrano e uccidono Riccio. La regina sviene. Douglas è colpito dalla vergogna e dall'orrore - si ritira volontariamente in esilio. Henry è preoccupato se la regina lo odierà. Lindsay porta via il re, sussurrandogli della caccia imminente. Queen Botwell è invitata da Queen. Mary torna in sé, vede Botvel e gli confessa il suo amore. La botvel la costringe ad ammettere che vuole la morte di Henry e le dà la sua bottiglia di veleno, dicendo che questo è un sonnifero. Maria dà al re questa "medicina", ma il veleno beve il buffone. Tuttavia, nulla può fermare l'intrigo omicida: Botwell fa saltare in aria la casa di re Enrico. In lontananza si sentono le grida crescenti della folla. La botvel con la regina si nasconde.