Antioco, re di Comagena, una regione della Siria, annessa all'Impero romano, che serve fedelmente Tito e conserva il suo titolo reale, è innamorato di Berenice. Sta aspettando da tempo l'opportunità di parlare con Berenice e scoprire qual è la sua decisione: se è pronta a diventare la moglie di Tito, Antioco lascerà Roma. Quando si incontra con lei, Antioco ammette di essersi innamorata di lei per tutti i cinque anni da quando l'ha incontrata, ma Berenice gli risponde che ha sempre amato solo Tito e l'amore le è più caro del potere e della corona dell'imperatore.

Berenice parla con la sua confidente Foinika e suggerisce che sarà difficile per Titus aggirare la legge. Ma Berenice crede in Tito e nel suo amore e aspetta che venga accolta dall'arrogante senato.

Nel frattempo, Tito chiede al suo confidente Paolino cosa pensano di lui e Berenice a Roma. L'imperatore non è interessato all'opinione di una corte servile e di nobili: sono sempre pronti a sopportare qualsiasi capriccio di Cesare, poiché sopportarono e approvarono "tutta la meschinità di Nerone". Tito è interessato all'opinione della gente e Paulin gli risponde che anche se Berenice è degno di bellezza come una corona, nessuno nella capitale "vorrebbe chiamarla imperatrice". Nessuno dei predecessori di Tito ha violato la legge sul matrimonio. E anche Giulio Cesare, che amava Cleopatra, "non poteva nominare la moglie egiziana". Sia la crudele Caligola che l '"abominevole" Nero, "avendo corretto tutto ciò che la gente ha onorato per secoli", hanno rispettato la legge e "non hanno visto il vile matrimonio con loro. E l'ex schiavo Felice, che divenne procuratore della Giudea, era sposato con una delle sorelle di Berenice, e nessuno a Roma vorrebbe che quella la cui sorella aveva portato lo schiavo di ieri a suo marito salisse al trono. Tito ammette di aver lottato a lungo con amore per Berenice, e ora che suo padre è morto e un pesante fardello di potere gli è rimasto sulle spalle, Tito deve abbandonarsi. La gente lo sta osservando e l'imperatore non può iniziare la sua regola violando la legge, Tito decide di dire a Berenice di tutto, ha paura di questa conversazione.

Berenice è preoccupata per il suo destino - il lutto di Tito per suo padre è finito, ma l'imperatore tace. Crede che Titus la ami. Tito soffre e non osa dire a Berenice che deve abbandonarla. Berenice non riesce a capire cosa ha fatto. Forse ha paura di infrangere la legge? Ma lui stesso le disse che nessuna legge poteva separarli. Forse Tito ha scoperto del suo incontro con Antioco e la gelosia ha parlato in lui?

Tito apprende che Antioco lascerà Roma ed è molto sorpreso e infastidito: ha bisogno del suo vecchio amico, con il quale hanno combattuto insieme. Tito dice ad Antioco che deve separarsi da Berenice: è Cesare, che decide il destino del mondo, ma non è in grado di dare il suo cuore a chi ama. Roma accetta di riconoscere sua moglie solo come romana - "qualsiasi, miserabile - ma solo per il suo sangue", e se l'imperatore non dice addio alla "figlia d'Oriente", allora "di fronte a lei il popolo arrabbiato chiederà la sua espulsione". Tito chiede ad Antioco di informarla della sua decisione. Vuole che il suo amico, insieme a Berenice, parta per l'Oriente e rimanga un buon vicino nei suoi regni.

Antioco non sa cosa fare: piangere o ridere. Spera che sulla strada per la Giudea sarà in grado di convincere Berenice a sposarlo dopo che Cesare l'ha respinta. Arshak, il suo amico, sostiene Antiochia: sarà vicino a Berenice e Tito è lontano.

Antiochia prova a parlare con Berenice, ma esita a dire direttamente cosa la aspetta. Sentendo che qualcosa non andava, Berenice esige franchezza e Antioco la informa della decisione di Tito. Non vuole credere e vuole imparare tutto da sola dall'imperatore. Antioco ora proibisce di avvicinarsi a lei.

Prima di incontrare Berenice, Tito pensa a cosa fare. È solo sette giorni sul trono dopo la morte di suo padre, e tutti i suoi pensieri non riguardano gli affari del governo, ma l'amore. Tuttavia, l'imperatore si rende conto che non appartiene a se stesso, è responsabile nei confronti del popolo.

Berenice appare e gli chiede se le è stata detta la verità? Cesare risponde che non importa quanto sia difficile per lui prendere una decisione del genere, dovranno andarsene. Berenice lo rimprovera: avrebbe dovuto dire le leggi romane quando si erano incontrati per la prima volta. Sarebbe più facile per lei fare un rifiuto. Tito risponde a Berenice che non sapeva come sarebbe finito il suo destino e non pensava che sarebbe diventato imperatore. Ora non vive - la vita è finita, ora regna. Berenice chiede di cosa ha paura Cesare: rivolte in città, in campagna? Tito risponde che se "le abitudini dell'insulto del padre" causano disordini, allora dovrà forzare la sua scelta, "e pagare per il silenzio del popolo", e non si sa a quale costo. Berenice propone di cambiare la "legge ingiusta". Ma Tito giurò a Roma "la legge per tenerlo", è suo dovere, "non c'è altro modo, e dobbiamo seguirlo senza sosta". È necessario mantenere la parola, come mantenevano i suoi predecessori. Berenice, disperato, rimprovera Cesare per aver creduto che sia il più alto dovere "scavare la sua tomba". Non vuole rimanere a Roma "un divertimento per i romani ostili e malevoli". Decide di suicidarsi. Tito ordina ai servi di seguire Berenice e impedirle di completare il suo piano.

La notizia della rottura di Cesare con la regina si diffonde in tutta la città: "Roma si rallegra, ogni tempio è aperto al popolo". Antioco per l'eccitazione - vede che Berenice si precipita "in immenso dolore" e richiede un pugnale e un veleno.

Tito incontra di nuovo Berenice e lei gli annuncia che se ne sta andando. Non vuole sentire come la gente gongola. Tito le risponde che non può separarsi da lei, ma non può rifiutare il trono e abbandonare il popolo romano. Se lo avesse fatto e se ne fosse andato con Berenice, allora lei stessa si sarebbe vergognata di "una guerriera senza reggimenti e Cesare senza corona". Il potere e il matrimonio con la regina sono incompatibili, ma l'anima dell'imperatore non può più sopportare un simile tormento: è pronto a morire se Berenice non gli giura di non prendere le sue mani.

Appare Antioco: per molto tempo ha nascosto a Cesare il suo amore per la regina, ma non poteva più nascondersi. Vedendo come soffrono, è pronto per amore di Cesare e Berenice a sacrificare la sua vita agli dei in modo che abbiano misericordia, Berenice, "gettato nella vergogna" dalla grandezza delle anime di entrambi, vedendo una tale volontà di sacrificare Tito e Antioco, implora loro di non soffrire così per lei non ne vale la pena. La regina accetta di vivere in separazione e chiede a Tito di dimenticarsi di lei. Chiama Antioco per dimenticare l'amore. Il ricordo di tutti e tre rimarrà negli annali come esempio dell'amore più tenero, ardente e senza speranza.